追記：2020年3月18日 PM0時30分
北海道のMさんから下記の情報あり。
この用量設定については、3月8日から投稿し始めた私の論文と同じである。
今は3つめのジャーナルに投稿中なので、
この情報は、世界中に広がっている。
昨日、イタリアの大学から治験をしたいという話がり、
今日の朝、〇〇薬品に問い合わせたが、「お断りする」と言われた。
きっと、会社の上の方まで、私の話は届いていないのだろう。。。
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＜コピペ＞
日経バイオテクonline
https://bio.nikkeibp.co.jp/atcl/news/p1/20/03/16/06694/
東京大がカモスタットの新型コロナに対する臨床研究を計画
ドイツ研究者がCell誌に報告した小野薬の慢性膵炎治療薬
(2020.03.17
08:00)
橋本宗明
ドイツ霊長類センターなどの研究班は3月上旬、新型コロナウイルスの細胞への侵入機構について細胞株を用いてin vitroで実験した結果を、ライフサイエンスの学術誌「Cell」に論文投稿した。この研究論文では、カモスタットメシル酸塩が、新型コロナウイルスのヒト細胞への感染を妨げることを培養細胞などを使った実験で確認したと報告している。こうした研究に基づいて、東京大学医学系研究科では新型コロナウイルスによる肺炎（COVID-19）に対するカモスタットの臨床研究を計画している。
Cell誌の論文では、新型コロナウイルスがヒトの細胞に感染する際に、細胞の膜上にあるACE2と呼ばれる受容体たんぱく質に結合した後、やはり細胞膜上にあるセリンプロテアーゼと呼ばれる酵素の1種であるTMPRSS2を利用して細胞内に侵入していることが報告されている。カモスタットはTMPRSS2を妨げる働きを持つことが知られており、重症呼吸器症候群（SARS）や中東呼吸器症候群（MERS）の原因となるコロナウイルスの感染を妨げることは、実験室レベルではこれまでにも報告されてきた。今回の論文ではカモスタットが、新型コロナウイルスやSARSウイルスがヒト細胞への感染を妨げることを報告している。
カモスタットはたんぱく質分解酵素の働きを妨げる作用を持つ薬で、小野薬品工業が創出し、1985年に「フオイパン錠」の名称で発売した。既に物質特許は切れており、国内で多数の後発品メーカーが同じ成分の薬を販売している。
今回の論文によると、現在、医薬品として使われているよりもかなり多くの量を投与しなければ、感染を防ぐ効果は得られなさそうだ。一方で、2016年に別の研究グループがマウスを使った動物実験によって、カモスタットがSARSウイルスの感染を妨げることを報告している。このときマウスには30mg/kgが1日2回投与された。マウス30mg/kgを対表面積でヒト等価用量に換算すると約150mgの1日2回投与で効果が得られる計算になる。カモスタットは慢性膵炎に対しては、1回200mgを1日3回投与されている。つまり、慢性膵炎に対して長年使われてきたのと同じ量で新型コロナウイルスに対する効果が得られる可能性があるのだ。
もちろんカモスタットは肺炎などに対する適応では承認されていないので、実用化に向けては重症肺炎などの患者を対象にする臨床研究で、安全性や有効性を確認する必要がある。ただ、カモスタットは日本と韓国でしか承認されていないので、それ以外の国で開発するには当局から動物実験などのデータを求められる可能性がある。従って、日本で使われている薬を用いて日本で臨床研究を行い、その安全性や有効性を検証するというのが、最もスピーディーな実用化への道といえそうだ。
この論文について小野薬品は、「論文で効果があったのは臨床で使っているよりもかなり多い量なので、うちでは積極的には検討していない。しかるべき機関から協力要請があれば前向きに対応するが、今のところは要請はない」（広報）としている。
ただ、アカデミアの中には期待を示す声もある。大分大学医学部付属病院臨床薬理センターの上村尚人センター長は、「どのぐらいの量で効果が得られるのかは十分に検討する必要があるが、既存薬の転用で有効なら早期の実用化が期待できる」と話す。また、東京大医科学系研究科が同薬の臨床研究を検討しているもようだ。
既に国内で承認、流通している医薬品で、新型コロナウイルスによる肺炎への効果が期待される薬としては、アッヴィの抗HIV薬である「カレトラ」（一般名ロピナビル・リトナビル）や、帝人ファーマが販売している気管支ぜんそく治療薬「オルベスコ」（同シクレソニド）などもある。シクレソニドは、神奈川県の県立病院が新型コロナウイルスによる肺炎患者3人に投与し、3人とも改善したと報告している。帝人ファーマは3月10日に、厚生労働省からの要請を受けて、同製剤を2万本確保し、臨床研究などに供給すると発表した。なお抗インフルエンザ薬の「アビガン」（ファビピラビル）も新型コロナウイルスに対する効果が期待されているが、アビガンの承認は備蓄用であり、臨床現場で広く使われた経験は無い。
いずれにしても、既存薬からの転用で、新型コロナウイルスへの対抗手段がよりスピーディーに見つかることに期待したい。
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2020年3月14日
Yoshiharu Uno
この件に関して、
世界中の人々を救うために、
現在、英語論文を投稿中です。
現在2番目のジャーナルで査読中です。
後に、
この論文を否定したジャーナル名を、
すべて英語で公開します。
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宇野
2020年3月5日 19時13分
驚きの記事を発見しました。
A group of scientists in Germany have identified a drug
called camostat mesylate, that they believe may work to combat COVID-19, the
disease caused by the SARS-CoV-2 coronavirus. ドイツの科学者グループは、カモスタットメシル酸塩と呼ばれる薬剤を特定しました。この薬剤は、SARS-CoV-2コロナウイルスによって引き起こされる病気であるCOVID-19と戦うのに役立つと信じています。
The new study published last week in Cell, shows that
SARS-CoV-2 binds to human cells in a similar way to the original SARS
coronavirus (SARS-CoV) that caused a worldwide outbreak in 2003, with this
binding depending on viral proteins called ‘spike’ proteins. 先週Cellで発表された新しい研究は、SARS-CoV-2が2003年に世界的な大流行を引き起こした元のSARSコロナウイルス（SARS-CoV）と同様の方法でスパイクと呼ばれるタンパク質がヒト細胞に結合することを示しています。
Spike is so named because that’s what it looks like: a
spike on the surface of the virus particle,” said Angela L. Rasmussen, PhD, a
virologist in the faculty of the Center for Infection and Immunity at the
Columbia Mailman School of Public Health. “In order for a virus to infect a
cell, it has to attach itself to a protein on the surface of that cell which we
call the receptor. For SARS-CoV-2, this is a protein called ACE2. Spike binds ACE2
and allows SARS-CoV-2 to enter and infect cells,” she added. 「スパイクは、ウイルス粒子の表面にスパイクがあるように見えるため、その名前が付けられています」と、 コロンビア・メールマン公衆衛生学校の感染症免疫学部のウイルス学者であるアンジェラL.ラスムッセン博士は言いました。
。
As well as this initial process, the spike protein has to
be primed by an enzyme called a protease in order for the virus to complete
entry into the cell. The study showed that similar to SARS-CoV, SARS-CoV-2 uses
a protease called TMPRSS2 to complete this process. 「ウイルスが細胞に感染するためには、その細胞の表面のタンパク質に自分自身を付着させなければなりません。それを受容体と呼びます。 SARS-CoV-2の場合、これはACE2と呼ばれるタンパク質です。スパイクはACE2に結合し、SARS-CoV-2が細胞に侵入して感染できるようにします」と彼女は付け加えました。
The scientists then looked at whether there were any
compounds available that could stop the entry of coronavirus into the cell by
stopping the TMPRSS2 protease from working. From previous work on SARS-CoV,
they found one potential candidate called camostat mesylate and showed that the
drug stopped SARS-CoV-2 from infecting lung cells in a dish. この最初のプロセスと同様に、ウイルスが細胞への侵入を完了するためには、スパイクタンパク質をプロテアーゼと呼ばれる酵素でプライミングする必要があります。この研究は、SARS-CoVと同様に、SARS-CoV-2がTMPRSS2と呼ばれるプロテアーゼを使用してこのプロセスを完了することを示しました。
The scientists then looked at whether there were any
compounds available that could stop the entry of coronavirus into the cell by
stopping the TMPRSS2 protease from working. From previous work on SARS-CoV,
they found one potential candidate called camostat mesylate and showed that the
drug stopped SARS-CoV-2 from infecting lung cells in a dish.
その後、科学者は、TMPRSS2プロテアーゼの機能を停止することにより、コロナウイルスの細胞への侵入を停止できる化合物があるかどうかを調べました。 SARS-CoVに関する以前の研究から、彼らはカモスタットメシル酸塩と呼ばれる1つの潜在的な候補を発見し、薬が標的となる肺細胞へのSARS-CoV-2の感染を阻止したことを示しました。
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本当であろうか？
このカモスタットメシル酸：camostat mesylateという薬は、慢性膵炎や逆流食道炎に使用される「フォイパン」で、
広く日本で使用されている薬であり、ジェネリックでは1錠8.8円です。
副作用などに関しては、長年の日本での使用で特に問題になったケースは聞いたことがないのです。
そんな安い薬で効くのか？
と、思っていたが、これについて、Nature
biotechnologyのnews（27 FEBRUARY 2020）の中にも確かに記されていました。
https://www.nature.com/articles/d41587-020-00003-1
Targeting
viral cellular entry via the spike glycoprotein, which mediates the virus–cell
receptor interaction, is another option for repurposing. SARS-CoV-2 uses
angiotensin-converting enzyme 2 (ACE2) and the cellular protease transmembrane
protease serine 2 (TMPRSS2) to enter target cells. The marketed TMPRSS2
inhibitor camostat
mesylate blocked cellular entry of the SARS-CoV-2 virus,
according to an unpublished preprint. And the Janus-associated kinase (JAK)
inhibitor Olumiant (baricitinib), approved for rheumatoid arthritis, was
identified using machine learning algorithms on the basis of
its inhibition of ACE2-mediated endocytosis. Another JAK inhibitor, Jakafi
(ruxolitinib), is in trials (combined with mesenchymal stem cell infusion) for
COVID-19.
ウイルスと細胞受容体の相互作用を媒介するスパイク糖タンパク質を介したウイルスの細胞侵入を標的とすることは、再目的化のための別の選択肢です。 SARS-CoV-2は、アンジオテンシン変換酵素2（ACE2）と細胞プロテアーゼ膜貫通プロテアーゼセリン2（TMPRSS2）を使用して、標的細胞に入ります。 未発表のプレプリントによると、市販のTMPRSS2阻害剤カモスタットメシル酸塩は、SARS-CoV-2ウイルスの細胞侵入をブロックしました。 関節リウマチで承認されているヤヌス関連キナーゼ（JAK）阻害剤オルミアント（バリシチニブ）は、ACE2を介したエンドサイトーシスの阻害に基づいて、機械学習アルゴリズムを使用して特定されました。 別のJAK阻害剤であるJakafi（ルキソリチニブ）は、COVID-19について（間葉系幹細胞注入と組み合わせて）試行中です。
・・・・・・・・
スパイクをブロックするのであれば、
理論的には、予防薬にもなります。
これが、効果があるのであれば
症状のある人に飲ませればいい。。。
＜更新１＞
2020年3月6日 15時30分
2020年3月6日
インパクトファクター３６の科学ジャーナルCellに
掲載されたドイツの研究者らの論文が、
本日、ネット上に公開された。
https://www.cell.com/cell/pdf/S0092-8674(20)30229-4.pdf
SARS-CoV-2
Cell Entry Depends on ACE2 and TMPRSS2 and Is Blocked by a Clinically Proven
Protease Inhibitor
SUMMARY
The
recent emergence of the novel, pathogenic SARS-coronavirus 2 (SARS-CoV-2) in
China and its rapid national and international spread pose a global health
emergency. Cell entry of coronaviruses depends on binding of the viral spike
(S) proteins to cellular receptors and on S protein priming by host cell
proteases. Unravelling which cellular factors are used by SARS-CoV-2 for entry
might provide insights into viral transmission and reveal therapeutic targets.
Here, we demonstrate that SARS-CoV-2 uses the SARS-CoV receptor ACE2 for entry
and the serine protease TMPRSS2 for S protein priming. A TMPRSS2 inhibitor
approved for clinical use blocked entry and might constitute a treatment
option. Finally, we show that the sera from convalescent SARS patients
cross-neutralized SARS-2- S-driven entry. Our results reveal important
commonalities between SARS-CoV-2 and SARS-CoV infection and identify a
potential target for antiviral intervention.
INTRODUCTION
Several
members of the family Coronaviridae constantly circulate in the human
population and usually cause mild respiratory disease (Corman et al., 2019). In
contrast, the severe acute respiratory syndrome coronavirus (SARS-CoV) and the
Middle East respiratory syndrome coronavirus (MERS-CoV) are transmitted from
animals to humans and cause severe respiratory diseases in afflicted individuals,
SARS and MERS, respectively (Fehr et al., 2017). SARS emerged in 2002 in
Guangdong province, China, and its subsequent global spread was associated with
8,096 cases and 774 deaths (de Wit et al., 2016; WHO, 2004). Chinese horseshoe
bats serve as natural reservoir hosts for SARS-CoV (Lau et al., 2005; Li et
al., 2005a). Human transmission was facilitated by intermediate hosts like
civet cats and raccoon dogs, which are frequently sold as food sources in
Chinese wet markets (Guan et al., 2003). At present, no specific antivirals or
approved vaccines are available to combat SARS, and the SARS pandemic in 2002
and 2003 was finally stopped by conventional control measures, including travel
restrictions and patient isolation.
In
December 2019, a new infectious respiratory disease emerged in Wuhan, Hubei
province, China (Huang et al., 2020; Wang et al., 2020; Zhu et al., 2020). An
initial cluster of infections was linked to Huanan seafood market, potentially
due to animal contact. Subsequently, human-to-human transmission occurred (Chan
et al., 2020) and the disease, now termed coronavirus disease 19 (COVID-19)
rapidly spread within China. A novel coronavirus, SARS-coronavirus 2
(SARS-CoV-2), which is closely related to SARS-CoV, was detected in patients
and is believed to be the etiologic agent of the new lung disease (Zhu et al.,
2020). On February 12, 2020, a total of 44,730 laboratoryconfirmed infections
were reported in China, including 8,204 severe cases and 1,114 deaths (WHO,
2020). Infections were also detected in 24 countries outside China and were
associated with international travel. At present, it is unknown whether the
sequence similarities between SARS-CoV-2 and SARS-CoV translate into similar
biological properties, including pandemic potential (Munster et al., 2020).
The
spike (S) protein of coronaviruses facilitates viral entry into target cells.
Entry depends on binding of the surface unit, S1, of the S protein to a
cellular receptor, which facilitates viral attachment to the surface of target
cells. In addition, entry requires S protein priming by cellular proteases,
which entails S protein cleavage at the S1/S2 and the S2’ site and allows
fusion of viral and cellular membranes, a process driven by the S2 subunit
(Figure 1A). SARS-S engages angiotensin-converting enzyme 2 (ACE2) as the entry
receptor (Li et al., 2003) and employs the cellular serine protease TMPRSS2 for
S protein priming (Glowacka et al., 2011; Matsuyama et al., 2010; Shulla et
al., 2011). The SARS-S/ACE2 interface has been elucidated at the atomic level,
and the efficiency of ACE2 usage was found to be a key determinant of SARS-CoV
transmissibility (Li et al., 2005a, 2005b). SARS-S und SARS-2-S share 76% amino
acid identity. However, it is unknown whether SARS-2-S like SARS-S employs ACE2
and TMPRSS2 for host cell entry.
コロナウイルスのスパイク（S）タンパク質は、標的細胞へのウイルス侵入を促進します。侵入は、Sタンパク質の表面ユニットS1の細胞受容体への結合に依存し、標的細胞の表面へのウイルスの付着を促進します。さらに、エントリーには、細胞プロテアーゼによるSタンパク質プライミングが必要です。これは、S1 / S2およびS2部位でのSタンパク質切断を伴い、ウイルス膜と細胞膜の融合を可能にします。これはS2サブユニットによって駆動されます（図1A）。 SARS-Sは、アンジオテンシン変換酵素2（ACE2）を侵入受容体として関与させ（Li et al。、2003）、Sタンパク質のプライミングに細胞セリンプロテアーゼTMPRSS2を使用します（Glowacka et al。、2011; Matsuyama et al。、2010; Shulla et al。、2011）。 SARS-S / ACE2インターフェースは原子レベルで解明されており、ACE2の使用効率がSARS-CoV伝達率の重要な決定要因であることがわかりました（Li et al。、2005a、2005b）。 SARS-SとSARS-2-Sは76％のアミノ酸同一性を共有しています。ただし、SARS-SのようなSARS-2-SがホストセルエントリにACE2およびTMPRSS2を使用するかどうかは不明です。
RESULTS
Evidence
for Efficient Proteolytic Processing of SARS-2-S The goal of our study was to
obtain insights into how SARS-2-S facilitates viral entry into target cells and
how this process can be blocked. For this, we first asked whether SARS-2-S is
robustly expressed in a human cell line, 293T, commonly used for
experimentation because of its high transfectability. Moreover, we analyzed
whether there is evidence for proteolytic processing of the S protein because
certain coronavirus S proteins are cleaved by host cell proteases at the S1/S2
cleavage site in infected cells (Figure 1A). Immunoblot analysis of 293T cells
expressing SARS-2-S protein with a C-terminal antigenic tag revealed a band
with a molecular weight expected for unprocessed S protein (S0) (Figure 1B). A
band with a size expected for the S2 subunit of the S protein was also observed
in cells and, more prominently, in vesicular stomatitis virus (VSV) particles
bearing SARS-2-S (Figure 1B). In contrast, an S2 signal was largely absent in
cells and particles expressing SARS-S (Figure 1B), as previously documented
(Glowacka et al., 2011; Hofmann et al., 2004b). These results suggest efficient
proteolytic processing of SARS-2-S in human cells, in keeping with the presence
of several arginine residues at the S1/S2 cleavage site of SARS-2-S but not
SARS-S (Figure 1A). In contrast, the S20 cleavage site of SARS-2-S was similar
to that of SARS-S.
SARS-2-Sの効率的なタンパク質分解処理の証拠本研究の目的は、SARS-2-Sが標的細胞へのウイルス侵入を促進する方法と、このプロセスをブロックする方法についての洞察を得ることでした。このために、我々はSARS-2-Sが高いトランスフェクション性のために実験に一般的に使用されるヒト細胞株293Tで堅牢に発現するかどうかを最初に研究した。さらに、特定のコロナウイルスSタンパク質が感染細胞のS1 / S2切断部位で宿主細胞プロテアーゼによって切断されるため、Sタンパク質のタンパク質分解処理の証拠があるかどうかを分析しました（図1A）。 C末端抗原タグを持つSARS-2-Sタンパク質を発現する293T細胞の免疫ブロット分析により、未処理のSタンパク質（S0）に予想される分子量のバンドが明らかになりました（図1B）。 Sタンパク質のS2サブユニットに予想されるサイズのバンドも、細胞内で、より顕著には、SARS-2-Sを保有する水疱性口内炎ウイルス（VSV）粒子で観察されました（図1B）。対照的に、S2シグナルは、以前に記録されたように（Glowacka et al。、2011; Hofmann et al。、2004b）、SARS-Sを発現する細胞および粒子にはほとんど存在しませんでした（図1B）。これらの結果は、SARS-Sではなく、SARS-2-SのS1 / S2切断部位にいくつかのアルギニン残基が存在することで、ヒト細胞におけるSARS-2-Sの効率的なタンパク質分解プロセシングを示唆しています（図1A）。対照的に、SARS-2-SのS20切断部位はSARS-Sのものと類似していた。
SARS-2-S
and SARS-S Mediate Entry into a Similar Spectrum of Cell Lines
Replication-defective VSV particles bearing coronavirus S proteins faithfully
reflect key aspects of coronavirus host cell entry (Kleine-Weber et al., 2019).
We employed VSV pseudotypes bearing SARS-2-S to study cell entry of SARS-CoV-2.
Both SARS-2-S and SARS-S were robustly incorporated into VSV particles (Figure
1B), allowing a meaningful side-by-side comparison; although, formally,
comparable particle incorporation of the S1 subunit remains to be demonstrated.
We first asked which cell lines were susceptible to SARS-2-S-driven entry,
using a panel of well-characterized cell lines of human and animal origin,
respectively. All cell lines were readily susceptible to entry driven by the
glycoprotein of the pantropic VSV (VSV-G) (Figure 1C; Figure S1), as expected.
Most human cell lines and the animal cell lines Vero and MDCKII were also
susceptible to entry driven by SARS-S (Figure 1C). Moreover, SARS-2-S
facilitated entry into an identical spectrum of cell lines as SARS-S (Figure
1C), suggesting similarities in choice of entry receptors.
SARS-2-SおよびSARS-Sは、同様のスペクトルの細胞株への侵入を仲介するコロナウイルスSタンパク質を保有する複製欠損VSV粒子は、コロナウイルス宿主細胞侵入の重要な側面を忠実に反映しています（Kleine-Weber et al。、2019）。SARS-2-Sを含むVSV偽型を使用して、SARS-CoV-2の細胞侵入を研究しました。 SARS-2-SとSARS-Sの両方がVSV粒子に強固に組み込まれ（図1B）、意味のある並列比較が可能になりました。 正式には、S1サブユニットの同等の粒子取り込みが実証されていないままです。 最初に、ヒトと動物をそれぞれ特徴づけた細胞株のパネルを使用して、どの細胞株がSARS-2-S駆動型の侵入を受けやすいかを尋ねました。 すべての細胞株は、予想通り、パントロピックVSV（VSV-G）の糖タンパク質（図1C;図S1）によって引き起こされる侵入を容易に受けました。 ほとんどのヒト細胞株および動物細胞株VeroおよびMDCKIIも、SARS-Sによって引き起こされる侵入の影響を受けやすくなりました（図1C）。 さらに、SARS-2-SはSARS-Sと同じ細胞株への侵入を促進し（図1C）、侵入受容体の選択における類似性を示唆しています。
SARS-CoV-2
Employs the SARS-CoV Receptor for Host Cell Entry In order to elucidate why
SARS-S and SARS-2-S mediated entry into the same cell lines, we next determined
whether SARS-2-S harbors amino acid residues required for interaction with the
SARS-S entry receptor ACE2. Sequence analysis revealed that SARS-CoV-2 clusters
with SARS-CoV-related viruses from bats (SARSr-CoV), of which some but not all
can use ACE2 for host cell entry (Figure 2A; Figure S2). Analysis of the
receptor binding motif (RBM), a portion of the receptor binding domain (RBD)
that makes contact with ACE2 (Li et al., 2005a), revealed that most amino acid
residues essential for ACE2 binding by SARS-S were conserved in SARS-2-S
(Figure 2B). In contrast, most of these residues were absent from S proteins of
SARSrCoV previously found not to use ACE2 for entry (Figure 2B) (Ge et al.,
2013; Hoffmann et al., 2013; Menachery et al., 2020). In agreement with these
findings, directed expression of human and bat (Rhinolophus alcyone) ACE2 but
not human DPP4, the entry receptor used by MERS-CoV (Raj et al., 2013), or
human APN, the entry receptor used by HCoV-229E (Yeager et al., 1992), allowed
SARS-2-S- and SARS-S-driven entry into otherwise non-susceptible BHK-21 cells
(Figure 3A). Moreover, antiserum raised against human ACE2 blocked SARS-S- and
SARS-2-S- but not VSV-G- or MERS-S-driven entry (Figure 3B). Finally, authentic
SARS-CoV-2 infected BHK-21 cells transfected to express ACE2 cells but not
parental BHK-21 cells with high efficiency (Figure 3C), indicating that
SARS-2-S, like SARS-S, uses ACE2 for cellular entry.
SARS-CoV-2は宿主細胞侵入にSARS-CoV受容体を採用SARS-SとSARS-2-Sが同じ細胞株への侵入を仲介する理由を解明するために、次にSARS-2-Sがアミノ酸残基を含むかどうかを決定しましたSARS-Sエントリー受容体ACE2との相互作用に必要です。配列分析により、SARS-CoV-2はコウモリのSARS-CoV関連ウイルス（SARSr-CoV）とクラスターを形成することが明らかになりましたが、その一部は宿主細胞侵入にACE2を使用できます（図2A;図S2）。 ACE2と接触する受容体結合ドメイン（RBD）の一部である受容体結合モチーフ（RBM）の分析（Li et al。、2005a）は、SARS-SによるACE2結合に不可欠なほとんどのアミノ酸残基が保存されていることを明らかにしましたSARS-2-S（図2B）。対照的に、これらの残基のほとんどは、以前はエントリーにACE2を使用しないことが判明したSARSrCoVのSタンパク質には存在していませんでした（図2B）（Ge et al。、2013; Hoffmann et al。、2013; Menachery et al。、2020）。これらの発見と一致して、MERS-CoVが使用する侵入受容体であるヒトDPP4ではなく、ヒトおよびコウモリ（Rhinolophus alcyone）ACE2の発現（Raj et al。、2013）、またはHCoVで使用される侵入受容体であるヒトAPN 229E（Yeager et al。、1992）により、SARS-2-SおよびSARS-S駆動型の、他の方法では感受性のないBHK-21細胞への侵入が可能になりました（図3A）。さらに、ヒトACE2に対して生成された抗血清は、SARS-SおよびSARS-2-Sをブロックしましたが、VSV-GまたはMERS-Sによる侵入はブロックしませんでした（図3B）。最後に、本物のSARS-CoV-2に感染したBHK-21細胞はACE2細胞を発現するようにトランスフェクトされましたが、親BHK-21細胞は高効率で発現しsezu（図3C）、SARS-2-Sは、SARS-Sと同様に、セルラーエントリにACE2を使用することを示します。
The
Cellular Serine Protease TMPRSS2 Primes SARS-2- S for Entry, and a Serine
Protease Inhibitor Blocks SARS-CoV-2 Infection of Lung Cells We next
investigated protease dependence of SARS-CoV-2 entry. SARS-CoV can use the
endosomal cysteine proteases cathepsin B and L (CatB/L) (Simmons et al., 2005)
and the serine protease TMPRSS2 (Glowacka et al., 2011; Matsuyama et al., 2010;
Shulla et al., 2011) for S protein priming in cell lines, and inhibition of
both proteases is required for robust blockade of viral entry (Kawase et al.,
2012). However, only TMPRSS2 activity is essential for viral spread and
pathogenesis in the infected host whereas CatB/L activity is dispensable
(Iwata-Yoshikawa et al., 2019; Shirato et al., 2016; Shirato et al., 2018; Zhou
et al., 2015).
In
order to determine whether SARS-CoV-2 can use CatB/L for cell entry, we
initially employed ammonium chloride, which elevates endosomal pH and thereby
blocks CatB/L activity. 293T cells (TMPRSS2, transfected to express ACE2 for
robust S protein-driven entry) and Caco-2 cells (TMPRSS2+ ) were used as
targets. Ammonium chloride blocked VSV-G-dependent entry into both cell lines
whereas entry driven by Nipah virus F and G proteins was not affected (Figure
S3A; data not shown), consistent with Nipah virus but not VSV being able to
fuse directly with the plasma membrane (Bossart et al., 2002). Ammonium
chloride treatment strongly inhibited SARS-2-S- and SARS-S-driven entry into
TMPRSS2 293T cells (Figure S3 A), suggesting CatB/L dependence. Inhibition of
entry into TMPRSS2+ Caco-2 cells was less efficient compared to 293T cells
(Figure S3 A), which would be compatible with SARS-2-S priming by TMPRSS2 in
Caco-2 cells.
細胞性セリンプロテアーゼTMPRSS2はエントリーのためにSARS-2-Sをプライムし、セリンプロテアーゼ阻害剤は肺細胞のSARS-CoV-2感染をブロックします次に、SARS-CoV-2エントリーのプロテアーゼ依存性を調べました。 SARS-CoVは、エンドソームのシステインプロテアーゼであるカテプシンBおよびL（CatB / L）（Simmons et al。、2005）およびセリンプロテアーゼTMPRSS2（Glowacka et al。、2011; Matsuyama et al。、2010; Shulla et al。 、2011）細胞株におけるSタンパク質プライミング、および両方のプロテアーゼの阻害は、ウイルス侵入の強力な遮断に必要です（Kawase et al。、2012）。ただし、TMPRSS2活性のみが感染した宿主のウイルス拡散と病因に必須であり、CatB / L活性は不可欠ではありません（岩田-吉川ら、2019;白戸ら、2016;白戸ら、2018;周ら。、2015）。
SARS-CoV-2が細胞侵入にCatB / Lを使用できるかどうかを判断するために、最初に塩化アンモニウムを使用しました。塩化アンモニウムはエンドソームpHを上昇させ、CatB / L活性をブロックします。 293T細胞（TMPRSS2、堅牢なSタンパク質駆動型エントリーのためにACE2を発現するようにトランスフェクトされた）およびCaco-2細胞（TMPRSS2 +）が標的として使用されました。塩化アンモニウムは、両方の細胞株へのVSV-G依存性の侵入をブロックしましたが、ニパウイルスFおよびGタンパク質による駆動は影響を受けず（図S3A;データは示していません）、ニパウイルスと一致しますが、VSVはプラズマと直接融合できません膜（Bossart et al。、2002）。塩化アンモニウム処理は、SARS-2-SおよびSARS-SによるTMPRSS2 293T細胞への侵入を強く阻害し（図S3 A）、CatB / L依存性を示唆しています。 TMPRSS2 + Caco-2細胞への侵入の阻害は、293T細胞（図S3 A）と比較して効率が低く、Caco-2細胞でのTMPRSS2によるSARS-2-Sプライミングと互換性があります。
Indeed, the clinically proven serine protease inhibitor camostat mesylate, which
is active against TMPRSS2 (Kawase et al., 2012), partially blocked
SARS-2-S-driven entry into Caco-2 (Figure S3 B) and Vero-TMPRSS2 cells (Figure
4A). Full inhibition was attained when camostat mesylate and E-64d, an inhibitor of CatB/L,
were added (Figure 4A; Figure S3B), indicating that SARS-2-S can use both
CatB/L as well as TMPRSS2 for priming in these cell lines. In contrast, camostat mesylate did not
interfere with SARS-2-S-driven entry into the TMPRSS2 cell lines 293T (Figure
S3B) and Vero (Figure 4A), which was efficiently blocked by E-64d and therefore
is CatB/L dependent. Moreover, directed expression of TMPRSS2 rescued SARS-2-
S-driven entry from inhibition by E-64d (Figure 4B), confirming that SARS-2-S
can employ TMPRSS2 for S protein priming.
We
next analyzed whether TMPRSS2 usage is required for SARS-CoV-2 infection of
lung cells. Indeed, camostat
mesylate significantly reduced MERS-S-, SARS-S-, and SARS-2-S- but not
VSV-G-driven entry into the lung cell line Calu-3 (Figure 4C) and exerted no
unwanted cytotoxic effects (Figure S3 C). Similarly, camostat mesylate treatment significantly
reduced Calu-3 infection with authentic SARS-CoV-2 (Figure 4D). Finally, camostat mesylate
treatment inhibited SARS-S- and SARS-2-S- but not VSV-G-driven entry into
primary human lung cells (Figure 4E).
実際、臨床的に証明されたTMPRSS2に対して活性なセリンプロテアーゼ阻害剤カモスタットメシレート（Kawase et al。、2012）は、Caco-2（図S3 B）およびVero-TMPRSS2細胞へのSARS-2-S駆動の侵入を部分的にブロックしました（図4A）。カモスタットメシル酸塩とCatB
/ Lの阻害剤であるE-64dを追加すると完全な阻害が達成され（図4A;図S3B）、SARS-2-SはこれらのプライミングにCatB
/ LとTMPRSS2の両方を使用できることを示しています細胞株。対照的に、カモスタットメシル酸塩は、TMPRSS2細胞株293T（図S3B）およびVero（図4A）へのSARS-2-S駆動の侵入を妨げませんでした。これは、E-64dによって効率的にブロックされたため、CatB
/ Lに依存します。さらに、TMPRSS2の定方向発現は、SARS-2-Sによる侵入をE-64dによる阻害から救い出し（図4B）、SARS-2-SがSタンパク質のプライミングにTMPRSS2を使用できることを確認しました。
次に、肺細胞のSARS-CoV-2感染にTMPRSS2の使用が必要かどうかを分析しました。実際、カモスタットメシル酸塩は、MERS-S-、SARS-S-、およびSARS-2-S-を有意に減少させましたが、VSV-Gによる肺細胞株Calu-3への侵入は減少せず（図4C）、望ましくない細胞毒性効果を発揮しませんでした（図S3 C）。同様に、カモスタットメシル酸塩治療により、本物のSARS-CoV-2によるCalu-3感染が大幅に減少しました（図4D）。最後に、カモスタットメシル酸塩治療は、SARS-SおよびSARS-2-Sを阻害しましたが、VSV-Gによる初代ヒト肺細胞への侵入は阻害しませんでした（図4E）。
Collectively,
SARS-CoV-2 can use TMPRSS2 for S protein priming and camostat mesylate, an inhibitor of TMPRSS2,
blocks SARS-CoV-2 infection of lung cells. Evidence that Antibodies Raised
against SARS-CoV Will Cross-Neutralize SARS-CoV-2 Convalescent SARS patients
exhibit a neutralizing antibody response directed against the viral S protein
(Liu et al., 2006). We investigated whether such antibodies block
SARS-2-Sdriven entry. Four sera obtained from three convalescent SARS patients
inhibited SARS-S- but not VSV-G-driven entry in a concentration-dependent
manner (Figure 5). In addition, these sera also reduced SARS-2-S-driven entry,
although with lower efficiency compared to SARS-S (Figure 5). Similarly, rabbit
sera raised against the S1 subunit of SARS-S reduced both SARS-S- and
SARS-2-S-driven entry with high efficiency, and again inhibition of
SARS-S-driven entry was more efficient. Thus, antibody responses raised against
SARS-S during infection or vaccination might offer some level of protection
against SARS-CoV-2 infection.
まとめると、SARS-CoV-2はSタンパク質のプライミングにTMPRSS2を使用でき、TMPRSS2の阻害剤であるカモスタットメシル酸塩は肺細胞のSARS-CoV-2感染をブロックします。 SARS-CoVに対して発生した抗体がSARS-CoV-2を交差中和するという証拠回復期のSARS患者は、ウイルスSタンパク質に対する中和抗体反応を示します（Liu et al。、2006）。このような抗体がSARS-2-Sによる侵入をブロックするかどうかを調査しました。 3人の回復期のSARS患者から得られた4つの血清は、SARS-Sを阻害しましたが、VSV-G駆動のエントリは濃度依存的に阻害しませんでした（図5）。さらに、これらの血清は、SARS-2-Sに比べて効率は低いものの、SARS-2-Sによる参入も減少しました（図5）。同様に、SARS-SのS1サブユニットに対して発生したウサギ血清は、SARS-SとSARS-2-Sの両方による流入を高効率で減少させ、SARS-Sによる流入の抑制はより効率的でした。したがって、感染またはワクチン接種中にSARS-Sに対して生じた抗体応答は、SARS-CoV-2感染に対するある程度の保護を提供する可能性があります。
DISCUSSION
The
present study provides evidence that host cell entry of SARSCoV-2 depends on
the SARS-CoV receptor ACE2 and can be blocked by a clinically proven inhibitor
of the cellular serine protease TMPRSS2, which is employed by SARS-CoV-2 for S
protein priming. Moreover, it suggests that antibody responses raised against
SARS-CoV could at least partially protect against SARSCoV-2 infection. These
results have important implications for our understanding of SARS-CoV-2
transmissibility and pathogenesis and reveal a target for therapeutic
intervention. The finding that SARS-2-S exploits ACE2 for entry, which was also
reported by Zhou and colleagues (Zhou et al., 2020) while the present
manuscript was in revision, suggests that the virus might target a similar
spectrum of cells as SARS-CoV. In the lung, SARS-CoV infects mainly pneumocytes
and macrophages (Shieh et al., 2005). However, ACE2 expression is not limited
to the lung, and extrapulmonary spread of SARS-CoV in ACE2+ tissues was
observed (Ding et al., 2004; Gu et al., 2005; Hamming et al., 2004). The same
can be expected for SARS-CoV-2, although affinity of SARS-S and SARS-2-S for
ACE2 remains to be compared. It has been suggested that the modest ACE2
expression in the upper respiratory tract (Bertram et al., 2012; Hamming et
al., 2004) might limit SARS-CoV transmissibility. In light of the potentially
increased transmissibility of SARSCoV-2 relative to SARS-CoV, one may speculate
that the new virus might exploit cellular attachment-promoting factors with
higher efficiency than SARS-CoV to ensure robust infection of ACE2+ cells in
the upper respiratory tract. This could comprise binding to cellular glycans, a
function ascribed to the S1 domain of certain coronaviruses (Li et al., 2017;
Park et al., 2019). Finally, it should be noted that ACE2 expression protects
from lung injury and is downregulated by SARS-S (Haga et al., 2008; Imai et
al., 2005; Kuba et al., 2005), which might promote SARS. It will thus be
interesting to determine whether SARS-CoV-2 also interferes with ACE2
expression.
本研究は、SARSCoV-2の宿主細胞侵入がSARS-CoV受容体ACE2に依存し、Sタンパク質プライミングのためにSARS-CoV-2によって使用される細胞性セリンプロテアーゼTMPRSS2の臨床的に証明された阻害剤によってブロックできる証拠を提供します。さらに、SARS-CoVに対して発生した抗体応答は、SARSCoV-2感染から少なくとも部分的に保護できることが示唆されています。これらの結果は、SARS-CoV-2の伝達性と病因の理解に重要な意味を持ち、治療的介入のターゲットを明らかにします。現在の原稿の改訂中に、SARS-2-SがACE2を利用して侵入するという発見は、Zhouと同僚（Zhou et al。、2020）によっても報告されており、ウイルスがSARSと同様のスペクトルの細胞を標的とする可能性があることを示唆しています-CoV。肺では、SARS-CoVは主に肺細胞とマクロファージに感染します（Shieh et al。、2005）。ただし、ACE2の発現は肺に限定されず、ACE2 +組織でのSARS-CoVの肺外拡散が観察されました（Ding et al。、2004; Gu et al。、2005; Hamming et al。、2004）。 ACE2に対するSARS-SとSARS-2-Sの親和性はまだ比較されていませんが、SARS-CoV-2でも同じことが予想されます。上気道における控えめなACE2発現（Bertram et al。、2012; Hamming et al。、2004）により、SARS-CoVの伝達性が制限される可能性が示唆されています。 SARS-CoVと比較してSARSCoV-2の潜在的に増加した伝達性に照らして、新しいウイルスは上気道のACE2 +細胞の確実な感染を確実にするためにSARS-CoVよりも高い効率で細胞付着促進因子を利用するかもしれないと推測するかもしれません。これには、細胞グリカンへの結合、特定のコロナウイルスのS1ドメインに起因する機能が含まれます（Li et al。、2017; Park et al。、2019）。最後に、ACE2発現は肺損傷から保護し、SARS-Sによってダウンレギュレートされることに注意する必要があります（Haga et al。、2008; Imai et al。、2005; Kuba et al。、2005）。したがって、SARS-CoV-2がACE2発現にも干渉するかどうかを判断することは興味深いでしょう。
Priming
of coronavirus S proteins by host cell proteases is essential for viral entry
into cells and encompasses S protein cleavage at the S1/S2 and the S20 sites.
The S1/S2 cleavage site of SARS-2-S harbors several arginine residues
(multibasic), which indicates high cleavability. Indeed, SARS-2-S was
efficiently cleaved in cells, and cleaved S protein was incorporated into VSV
particles. Notably, the cleavage site sequence can determine the zoonotic
potential of coronaviruses (Menachery et al., 2020; Yang et al., 2014, 2015),
and a multibasic cleavage site was not present in RaTG13, the coronavirus most
closely related to SARS-CoV-2. It will thus be interesting to determine whether
the presence of a multibasic cleavage site is required for SARS-CoV-2 entry
into human cells and how this cleavage site was acquired. The S proteins of SARS-CoV
can use the endosomal cysteine proteases CatB/L for S protein priming in
TMPRSS2 cells (Simmons et al., 2005). However, S protein priming by TMPRSS2 but
not CatB/L is essential for viral entry into primary target cells and for viral
spread in the infected host (Iwata-Yoshikawa et al., 2019; Kawase et al., 2012;
Zhou et al., 2015). The present study indicates that SARS-CoV-2 spread also
depends on TMPRSS2 activity, although we note that SARS-CoV-2 infection of
Calu-3 cells was inhibited but not abrogated by camostat mesylate, likely
reflecting residual S protein priming by CatB/L. One can speculate that
furin-mediated precleavage at the S1/S2 site in infected cells might promote
subsequent TMPRSS2-dependent entry into target cells, as reported for MERS-CoV
(Kleine-Weber et al., 2018; Park et al., 2016). Collectively, our present
findings and previous work highlight TMPRSS2 as a host cell factor that is
critical for spread of several clinically relevant viruses, including influenza
A viruses and coronaviruses (Gierer et al., 2013; Glowacka et al., 2011;
Iwata-Yoshikawa et al., 2019; Kawase et al., 2012; Matsuyama et al., 2010;
Shulla et al., 2011; Zhou et al., 2015). In contrast, TMPRSS2 is dispensable
for development and homeostasis (Kim et al., 2006) and thus constitutes an
attractive drug target. In this context, it is noteworthy that the serine
protease inhibitor camostat
mesylate, which blocks TMPRSS2 activity (Kawase et al., 2012; Zhou et
al., 2015), has been approved in Japan for human use, but for an unrelated
indication. This compound or related ones with potentially increased antiviral
activity (Yamamoto et al., 2016) could thus be considered for off-label
treatment of SARS-CoV-2-infected patients. Convalescent SARS patients exhibit a
neutralizing antibody response that can be detected even 24 months after
infection (Liu et al., 2006) and that is largely directed against the S
protein. Moreover, experimental SARS vaccines, including recombinant S protein
(He et al., 2006) and inactivated virus (Lin et al., 2007), induce neutralizing
antibody responses. Although confirmation with infectious virus is pending, our
results indicate that neutralizing antibody responses raised against SARS-S
could offer some protection against SARS-CoV-2 infection, which may have
implications for outbreak control. In sum, this study provided key insights
into the first step of SARS-CoV-2 infection, viral entry into cells, and
defined potential targets for antiviral intervention.
宿主細胞プロテアーゼによるコロナウイルスSタンパク質のプライミングは、ウイルスの細胞への侵入に不可欠であり、S1 / S2およびS20部位でのSタンパク質切断を含みます。 SARS-2-SのS1 / S2切断部位には、高い切断性を示すいくつかのアルギニン残基（多塩基性）が含まれています。実際、SARS-2-Sは細胞内で効率的に切断され、切断されたSタンパク質がVSV粒子に組み込まれました。特に、切断部位配列はコロナウイルスの人畜共通感染の可能性を決定できます（Menachery et al。、2020; Yang et al。、2014、2015）、また、SARS-CoV-2と最も密接に関連するコロナウイルスであるRaTG13には、多塩基切断部位は存在しませんでした。したがって、ヒト細胞へのSARS-CoV-2の侵入に多塩基切断部位の存在が必要かどうか、およびこの切断部位がどのように獲得されたかを判断することは興味深いでしょう。 SARS-CoVのSタンパク質は、TMPRSS2細胞のSタンパク質プライミングにエンドソームシステインプロテアーゼCatB / Lを使用できます（Simmons et al。、2005）。ただし、TMPRSS2によるSタンパク質のプライミングは、CatB / Lではなく、一次標的細胞へのウイルスの侵入と感染した宿主へのウイルスの拡散に不可欠です（岩田-吉川ら、2019;川瀬ら、2012; Zhouら。 、2015）。本研究は、SARS-CoV-2の広がりもTMPRSS2活性に依存することを示していますが、Calu-3細胞のSARS-CoV-2感染は阻害されたが、カモスタットメシレートによって抑制されず、CatB / L. MERS-CoVについて報告されているように、感染細胞のS1 / S2部位でのフリン介在性の事前切断が、その後のTMPRSS2依存性の標的細胞への侵入を促進する可能性があると推測できます（Kleine-Weber et al。、2018; Park et al。、2016 ）。まとめると、今回の知見と以前の研究は、インフルエンザAウイルスやコロナウイルスを含むいくつかの臨床的に関連するウイルスの拡散に重要な宿主細胞因子としてTMPRSS2を強調しています（Gierer et al。、2013; Glowacka et al。、2011; Iwata-Yoshikawaら、2019; Kawaseら、2012; Matsuyamaら、2010; Shullaら、2011; Zhouら、2015）。対照的に、TMPRSS2は発生および恒常性に不可欠ではなく（Kim et al。、2006）、したがって魅力的な薬物標的を構成します。これに関連して、TMPRSS2活性をブロックするセリンプロテアーゼ阻害剤カモスタットメシレート（Kawase et al。、2012; Zhou et al。、2015）が、ヒトでの使用とは無関係の適応で承認されていることは注目に値します。したがって、抗ウイルス活性が増加する可能性のあるこの化合物または関連化合物（Yamamoto et al。、2016）は、SARS-CoV-2感染患者の適応外治療として検討することができます。回復期のSARS患者は、感染から24か月後でも検出できる中和抗体反応を示し（Liu et al。、2006）、主にSタンパク質に対するものです。さらに、組換えSタンパク質（Heら、2006）および不活化ウイルス（Linら、2007）を含む実験的なSARSワクチンは、中和抗体反応を誘発します。感染性ウイルスの確認は保留中ですが、我々の結果は、SARS-Sに対して発生した中和抗体反応がSARS-CoV-2感染に対するある程度の保護を提供する可能性があることを示しています。要約すると、この研究は、SARS-CoV-2感染の最初のステップ、細胞へのウイルス侵入、および抗ウイルス介入の潜在的なターゲットの定義に関する重要な洞察を提供しました。
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ヒトにおけるSARSコロナウイルス-2の拡散の防止
ゲッチンゲン感染症の研究者は潜在的な薬剤を特定
Stopping virus spread
ウイルスの拡散を止める
A team of scientists led by infection biologists from the German Primate Centre and including researchers from Charité, the University of Veterinary Medicine Hannover Foundation, the BG-Unfallklinik Murnau, the LMU Munich, the Robert Koch Institute and the German Center for Infection Research, wanted to find out how the new coronavirus SARS-CoV-2 enters host cells and how this process can be blocked. The researchers identified a cellular protein that is important for the entry of SARS-CoV-2 into lung cells. "Our results show that SARS-CoV-2 requires the protease TMPRSS2, which is present in the human body, to enter cells," says Stefan Pöhlmann, head of the Infection Biology Unit at the German Primate Center. "This protease is a potential target for therapeutic intervention."
ドイツ霊長類センターの感染生物学者に率いられ、シャリテ、獣医学大学ハノーバー財団、BG-Unfallklinik Murnau、LMUミュンヘン、ロバートコッホ研究所、ドイツ感染症研究センターの研究者を含む科学者チームが望んでいました。新しいコロナウイルスSARS-CoV-2がどのように宿主細胞に侵入し、このプロセスがどのようにブロックされるかを調べます。研究者らは、肺細胞へのSARS-CoV-2の侵入に重要な細胞タンパク質を特定しました。「我々の結果は、SARS-CoV-2が細胞に入るために人体に存在するプロテアーゼTMPRSS2を必要とすることを示しています」と、ドイツ霊長類センターの感染生物学ユニットの責任者であるStefanPöhlmann氏は言います。「このプロテアーゼは、治療介入の潜在的な標的です。」
新しいコロナウイルスSARS-CoV-2の付着タンパク質「スパイク」は、SARS-CoVと同じ細胞付着因子（ACE2）を使用し、その活性化に細胞プロテアーゼTMPRSS2を使用します。 TMPRSS2に対する既存の臨床的に承認された薬剤は、肺細胞のSARS-CoV-2感染を抑制します。
Promising drug
有望な薬
Since it is known that the drug camostat mesilate inhibits the protease TMPRSS2, the researchers have investigated whether it can also prevent infection with SARS-CoV-2. "We have tested SARS-CoV-2 isolated from a patient and found that camostat mesilate blocks entry of the virus into lung cells," says Markus Hoffmann, the lead author of the study. Camostat mesilate is a drug approved in Japan for use in pancreatic inflammation. "Our results suggest that camostat mesilate might also protect against COVID-19," says Markus Hoffmann. "This should be investigated in clinical trials."
メシル酸カモスタットはプロテアーゼTMPRSS2を阻害することが知られているため、研究者はそれがSARS-CoV-2の感染も防ぐことができるかどうかを調査しました。「私たちは患者から分離されたSARS-CoV-2をテストし、カモスタットメシル酸塩がウイルスの肺細胞への侵入をブロックすることを発見しました」と、研究の筆頭著者であるMarkus Hoffmannは述べています。カモスタットメシル酸塩は、膵炎での使用が日本で承認された薬剤です。「当社の結果は、カモスタットメシル酸塩がCOVID-19からも保護する可能性があることを示唆しています」とMarkus Hoffmann氏は述べています。「これは臨床試験で調査する必要があります。」
Original publication
Hoffmann, M et al. (2020). SARS-CoV-2 cell entry depends on ACE2 and TMPRSS2 and is blocked by a clinically-proven protease inhibitor. Cell, DOI: 10.1016/j.cell.2020.02.052
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＜更新２＞
2020年3月6日 PM6時20分
Cellの査読を通過してアクセプトされたこの論文は、
信憑性がある。
PCR陽性で、自宅静養に人に、
この薬は、悪化を予防する唯一の選択肢となり得る。
カモスタットメシル酸塩の治験と保険適応拡大を！
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＜更新３＞ 2020年3月7日 AMA9時20分
「日本の薬」として世界中に発信されている
Potential drug to block coronavirus identified
コロナウイルスをブロックする可能性のある薬剤を特定
https://neurosciencenews.com/tmprss2-coronavirus-treatment-15873/
概要：コロナウイルスの肺へのウイルス侵入に不可欠な酵素をブロックすることが知られている臨床的に証明された薬剤は、COVID 19（SARS-CoV-2）感染をブロックします。薬剤、カモスタットメシル酸塩は、膵炎の治療のために日本で承認された薬剤です。結果は、この薬がCOVID 19からも保護する可能性があることを示唆しています。
ウイルスは病気を引き起こすために人体の細胞に侵入しなければなりません。このために、彼らは適切な細胞に付着し、これらの細胞に遺伝情報を注入します。ドイツ霊長類センター–ゲッティンゲンのライプニッツ霊長類研究所の感染生物学者は、シャリテ–ベルリン大学の同僚と一緒に、新しいコロナウイルスSARS-CoV-2が細胞に浸透する方法を調査しました。彼らは、肺細胞へのウイルス侵入に不可欠な細胞酵素であるプロテアーゼTMPRSS2を同定しました。TMPRSS2に対して有効であることが知られている臨床的に証明された薬剤は、SARS-CoV-2感染をブロックすることがわかり、新しい治療オプションを構成する可能性があります。
いくつかのコロナウイルスは世界中で流行しており、通常は軽度の呼吸器疾患のみを引き起こすヒトに絶えず感染しています。しかし、現在、私たちは101,000人以上の確定症例とほぼ3,500人の死亡を伴う新しいコロナウイルスの世界的な広がりを目の当たりにしています。新しいウイルスはSARS coronavirus-2と名付けられ、動物からヒトに感染しました。COVID-19と呼ばれる呼吸器疾患を引き起こし、重度の経過をたどることがあります。SARSコロナウイルス-2は2019年12月から拡散しており、2002/2003年にSARSのパンデミックを引き起こしたSARSコロナウイルスと密接に関連しています。現在、これらのウイルスと戦うためのワクチンや薬はありません。
ウイルスの拡散を止める
ドイツ霊長類センターの感染生物学者に率いられ、シャリテ、獣医学大学ハノーバー財団、BG-Unfallklinik Murnau、LMUミュンヘン、ロバートコッホ研究所、ドイツ感染症研究センターの研究者を含む科学者チームが望んでいました。新しいコロナウイルスSARS-CoV-2がどのように宿主細胞に侵入し、このプロセスがどのようにブロックされるかを調べます。研究者らは、肺細胞へのSARS-CoV-2の侵入に重要な細胞タンパク質を特定しました。「我々の結果は、SARS-CoV-2が細胞に入るために人体に存在するプロテアーゼTMPRSS2を必要とすることを示しています」と、ドイツ霊長類センターの感染生物学ユニットの責任者であるステファン・ポールマンは言います。「このプロテアーゼは、治療介入の潜在的な標的です。」
有望な薬
メシル酸カモスタットはプロテアーゼTMPRSS2を阻害することが知られているため、研究者はそれがSARS-CoV-2の感染も防ぐことができるかどうかを調査しました。「私たちは患者から分離されたSARS-CoV-2をテストし、カモスタットメシル酸塩が肺細胞へのウイルスの侵入をブロックすることを発見しました」とこの研究の主著者であるMarkus Hoffmannは述べています。カモスタットメシル酸塩は、膵炎での使用が日本で承認された薬剤です。「当社の結果は、カモスタットメシル酸塩がCOVID-19からも保護する可能性があることを示唆しています」とMarkus Hoffmann氏は言います。「これは臨床試験で調査する必要があります。」
